※ 仅供实验研究用

M65^® ELISA

　　M65^® ELISA检测来自死亡细胞释放的可溶性角蛋白18（K18），可以整体评估细胞的死亡情况，判断是由于细胞凋亡还是细胞坏死引起的细胞死亡。M65^® ELISA 最初是为了和M30 Apoptosense^® ELISA配套使用而设计研发的，后者特异性检测细胞凋亡。两者配套使用，可定量检测总的细胞死亡、细胞凋亡和细胞坏死。

　　由于M30 Apoptosense^® ELISA 和M65^® ELISA 都是用同一标准进行校对的，所以可以评估细胞死亡中细胞凋亡占的比例。

　　M65^® ELISA可用于检测人血清，并且带有CE标记（可用于体外诊断）

M65^® ELISA的应用领域

　　•　肝脏疾病：检测肝脏疾病患者肝细胞总的死亡情况。可用肝脏疾病检测。 
　　•　肿瘤：监测上皮细胞肿瘤经化疗后肿瘤细胞的死亡情况。 
　　•　毒理学：临床评估不同药物对肝脏细胞的毒性。

M65^® ELISA特点:

　　•　只特异性定量检测上皮细胞整体的死亡情况
　　•　与M30 Apoptosense^® ELISA 配套使用，定量检测细胞凋亡、细胞坏死和细胞死亡。
　　•　检测更稳定，特异性更高。
　　•　夹心法ELISA检测，可拆卸的96孔板。试剂即开即用

背景

　　体内细胞凋亡或者坏死引起肿瘤细胞死亡。细胞死亡的模式取决于细胞毒素刺激的类型和肿瘤的类型。细胞内ATP产生缺失通常会引起细胞凋亡，但有时候也会导致细胞坏死 （Leist et al., 1997）。细胞坏死期间，未经caspase水解的细胞内蛋白将会释放到细胞外。

　　角蛋白18（K18）是由很多种上皮细胞高表达的细胞内蛋白。大多数K18分子在细胞内是非可溶性的，但也报道有可溶性K18池（Chou et al., 1993）。细胞死亡期间，细胞内K18会释放到细胞外。检测细胞外可溶性的K18可反映上皮细胞的死亡情况“过程和原因”（由于细胞凋亡和细胞坏死导致） （Kramer et al., 2004）。

　　K18在细胞凋亡期间被caspase催化发生水解，caspase-cleaved片段释放到细胞外。因此细胞外的 caspase-cleaved K18 （ccK18）浓度反映了细胞凋亡的数量。而且M30：M65 比代表了总细胞死亡中细胞凋亡的比例（不同“M30：M65 比”） （Kramer et al., 2004）。

　　M65 EpiDeath^® ELISA 使用两种IgG型的K18小鼠单抗，评估人血清或则血浆中上皮细胞死亡情况。M30 Apoptosense^® ELISA 特异性检测在caspase-cleavaged K18 在Asp396形成的新表位 （K18Asp396-NE 或者M30 neo-epitope），反映上皮细胞的凋亡情况（Hägg et al. 2002; Bivén et al. 2003）。两种检测试剂盒的单位根据同一标准校对，可以计算caspase-cleaved和总K18（“M30：M65 比例”）。培养细胞诱导细胞凋亡导致caspase-cleaved K18释放，M30：M65比值较高，然而如果细胞发生死亡，只有K18的水平是升高的，所以M30：M65比值较低。

M65^® ELISA带有CE标记

　　M65® ELISA按照CE-IVD指示作为一种体外诊断的医疗器械注册。